β-半乳糖苷酶染色衰老细胞呈蓝色实验报告-上海郑核
一、实验器材及试剂
1、实验器材
名称 厂家 型号
冰冻切片机 Thermo CRYOSTAR NX50
切片刀 上海徕卡仪器有限公司 LEICA 819
载玻片 Servicebio
正置光学显微镜 日本尼康 Nikon Eclipse E100
成像系统 日本尼康 Nikon DS-U3
2、主要实验试剂
试剂名称 厂家 货号
OCT包埋剂 Sakura 4583
β-半乳糖苷酶染色固定液 碧云天生物技术有限公司 C0602-1
β-半乳糖苷酶染色液A 碧云天生物技术有限公司 C0602-2
β-半乳糖苷酶染色液B 碧云天生物技术有限公司 C0602-3
β-半乳糖苷酶染色液C 碧云天生物技术有限公司 C0602-4
X-Gal溶液 碧云天生物技术有限公司 C0602-5
甘油明胶封片剂 Servicebio G1402
二、染色步骤
1、工作液配制：染色液C 930ul，染色液A 10ul，染色液B 10ul，X-Gal溶液50ul，依次
加入，混匀即为工作液。
2、固定：取一张没经过固定的新鲜冰冻切片自然晾干，β-半乳糖苷酶固定液固定15min，倾去固定液，蒸馏水洗3遍；
3、β-半乳糖苷酶染色：甩干片子上的水，将工作液滴于组织上，于37℃孵育16至18h。
4. 倾去工作液，蒸馏充分水洗3次。
5. 甘油明胶封片剂封片。
三、结果判读：
衰老细胞呈蓝色。
四、注意事项：
1、标本需要是新鲜的冰冻切片或细胞，不能经过固定。
2、染液需要在-20℃的条件下储存，保质期一年。
3、工作液要现配现用，不可保存。
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