斑点叉尾鮰性成熟年龄为4龄以上，人工饲养条件好的少数3龄鱼可达性成熟，性成熟鱼体重为1000克以上。在江河、湖泊、水库和池塘中均能产卵于岩石突出物之下，或者淹没的树木、树桩、树根之下或河道的洞穴里产卵。斑点叉尾鮰的雄鱼是典型的筑巢鱼类，在与雌鱼交尾后赶走雌鱼，并守护受精卵发育直至孵出鱼苗。通常斑点叉尾鮰产卵温度范围为21～29℃，适温度为26℃，水温超过30℃不利于受精卵的胚胎发育和鱼苗成活。产卵时，每尾鱼通常以尾鳍包裹对方头部，雄鱼剧烈颤动鱼体并排出精液，与此同时，雌鱼开始产卵。卵受精后发粘，相互粘结而附于水池底部。雄鱼护卵时位于卵块上方，不断摆动腹鳍，以达到对受精卵增氧的作用。